Peraile Muñoz I., Gil García M., Guamán Collaguazo CE., González López L., Cabria Ramos JC. y ... clásica del anticuerpo por adsorción pasiva sino, al contrario, supone una pérdida de eficacia en cuanto a la inmunocaptura del antígeno. Otro método de inmovilización ensayado es el que emplea proteínas mediadoras como puente de unión entre el soporte y el anticuerpo. Esta es una unión muy fuerte, con una alta cons-tante de disociación, aunque no es una unión covalente, con lo que podría revertirse con la desnaturalización de la proteína. El uso de estas proteínas mediadoras permite una unión orien-tada del anticuerpo al unirse específicamente a la región cons-tante (Fc) del mismo, de forma que la región variable de unión al antígeno (Fab) queda accesible para la unión antígeno-an-ticuerpo. El uso de estas proteínas para la inmovilización de anticuerpos es muy extendido, no sólo en columnas de afinidad sino también en sensores. Trabajos recientes como los llevados a cabo por Shen y colaboradores (2017)9 ponen de manifiesto que la inmovilización orientada a través de estas proteínas me-diadoras es una técnica preferente en la fijación de anticuerpos a distintos soportes. Así, Anderson y colaboradores15 utiliza-ron la inmovilización de los anticuerpos a través de proteína A en un biosensor de fibra óptica. Dentro de estas proteínas mediadoras, destacan la proteína A, que pertenece a la pared celular de Staphylococcus aureus, y la proteína G, que es una proteína de superficie de los grupos C y G del género Streptococcus. Sin embrago, la reactividad que presentan ambas proteínas mediadoras por las distintas inmunoglobulinas es diferente. Por eso, en este trabajo se eligió una proteína quimérica A/G frente a la proteína A o a la proteína G, consiguiendo así un amplio espectro de unión y siendo menos dependiente de variaciones de pH. Además, en esta proteína quimérica se ha eliminado el sitio de unión de la proteína G a la albúmina sérica, con lo que se evi-tan uniones inespecíficas con la BSA, que es el antígeno utilizado en este modelo de inmunocaptura. Esta proteína quimérica ha sido usada en el desarrollo de biosensores como el SpectroSens para la monitorización de diversas biomoléculas16. Nuestros resultados muestran que, aunque la densidad del anticuerpo unido es menor que el observado en cualquiera de los otros dos métodos comparados (adsorción pasiva y unión covalente con glutaraldehído), el sistema es mucho más eficiente en cuanto a la inmunocaptura del antígeno. Resultados similares fueron obtenidos por Anderson y colaboradores 15 que obtuvie-ron una inmunocaptura más eficiente con el anticuerpo inmovi-lizado con proteína A que cuando el anticuerpo estaba inmovili-zado covalentemente. Puesto que en esta inmovilización la densidad del anticuerpo inmovilizado es menor, y el porcentaje de retención del anticuer-po no varía, el aumento en la eficacia de la inmunodetección será debido, posiblemente a la inmovilización orientada del mismo. Por lo tanto, el empleo de las proteínas A/G mejoran la efectividad del sistema de inmunocaptura, siendo necesaria una menor cantidad de anticuerpo para obtener resultados mucho mejores, lo que abarataría la producción del dispositivo de inmu-nodetección “on site”. El coste de la producción de anticuerpos específicos y sensibles frente a agentes de guerra biológicos son elevados, dada la infraestructura y permisos que requieren, sien-do 162 Sanid. mil. 2018; 74 (3) además necesario en la mayoría de los casos la obtención in house de los mismos por su ausencia en el mercado. Todo esto hace que la proteína recombinante A/G sea un método de elección en la inmovilización de anticuerpos en su-perficies de uso extendido como el nylon, para su aplicación en el desarrollo de biosensores de campo, de gran utilidad para las Fuerzas y Cuerpos de Seguridad del Estado ante una posible amenaza bioterrorista. AGRADECIMIENTOS Los trabajos recogidos en esta comunicación están inclui-dos en el proyecto coordinado OPTONANOSENS TEC2015- 63838-C3-2-R financiado con fondos MINECO / FEDER. BIBLIOGRAFÍA 1. Zacco E, Pividori MI, Alegret S. Electrochemical biosensing based on universal affinity biocomposite platforms. Biosens Bioelectron 2006; 21(7): 1291-1301. 2. Byrne B, Stack E, Gilmartin N, O’Kennedy R. Antibody-based sen-sors: principles, problems and potential for detection of pathogens and asso-ciated toxins. Sensors (Basel) 2009; 9(6): 4407-4445. 3. Alahi MEE, Chandra Mukhopadhyay SC. Detection Methodologies for Pathogen and Toxins: A Review. 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