Hematíes crioconservados, ¿qué queda al final del camino?
described in other works, an expiration time greater than 24 hours cannot be established because the supernatant hemoglobin after 7
days after defrosting reaches levels higher than those allowed, remaining the rest of the quality parameters. Regarding the influence
of frozen storage time, previous studies indicate the absence of influence on the quality of the product, however in our study it is
appreciated that the oldest components present higher rates of hemolysis on day 14 after thawing, which could motivated by the
previous conservation period. Conclusions: The components obtained after thawing and deglycerolization meet the technical-legal
requirements of the European Union in all aspects. The expiration of these products in our center is 24 hours, having to look for
modifications in the preparation process to extend it. The previous freezing time does not seem to influence the intensity of the
damage to cellular metabolism in the early stages of post-thaw storage, although it does seem to negatively influence the hemolysis
rate in the late stages of post-thaw storage. These components, due to their high lifespan, constitute a strategic reserve in the healthcare
aspect, because they are of the O negative and O positive group and therefore easy to use, and in the operational logistics aspect,
since they allow the deployment of large quantities on the ground without the limitation of the conservation time.
KEYWORDS: Cryopreserved red blood cells, storage injuries, quality, expiration, ACP 215.
Sanid. mil. 2021; 77(4) 181
INTRODUCCIÓN Y OBJETIVOS
La crioconservación de los hematíes, permite su conservación
por un período entre 10 y 30 años1,2. Esta vida tan prolongada
permite que estos componentes sean usados para
mantener la disponibilidad de unidades de grupos sanguíneos
poco frecuentes, o para crear almacenes de grupos sanguíneos
de donante universal para fines militares3,4. Estos componentes
se han usado en el marco de conflictos bélicos desde mediados
del siglo XX por distintos países, y actualmente el ejército americano
tiene preposicionados almacenes de estos componentes
en distintos niveles orgánicos, que tienen capacidad de procesamiento
y almacenamiento5. Asimismo, existen estudios que indican
que su uso tiene resultados clínicos similares a los obtenidos
con hematíes líquidos6,7. El Centro de Transfusión de las Fuerzas
Armadas (CTFAS), para cumplir con la misión encomendada,
mantiene un almacén de concentrados de hematíes glicerolizados
y posteriormente congelados, que debido a que su periodo
de caducidad alcanza los 30 años, deben ser monitorizados, para
asegurar que la calidad del producto final obtenido tras la descongelación
y desglicerolización es la establecida por los requisitos
técnico-legales, y así integrarlos dentro del sistema de gestión
de la calidad de nuestro centro.
El objetivo principal es determinar si las unidades de
hematíes crioconservadas, existentes en el almacén del Centro
de Transfusión de las Fuerzas Armadas (CTFAS), cumplen
con las especificaciones técnicas establecidas tras su descongelación
y desglicerolización y que permiten su uso clínico.
Como objetivo segundario se marca el estudio de la evolución
de diferentes parámetros de calidad en las unidades descongeladas
y desglicerolizadas, conservadas a 4 ± 2°C, en el transcurso
de los 14 días posteriores a su descongelación, en orden
a establecer si se puede ampliar la caducidad, ya que sólo está
certificada durante las 24 horas postdescongelación y desglicerolización
por los fabricantes de los equipos de procesado
y cualquier ampliación requiere una validación por parte de
cada centro2.
MATERIAL Y MÉTODOS
– Se hará una selección de 14 unidades crioconservadas,
pertenecientes al almacén del CTFAS, cubriendo las diferentes
caducidades existentes en el almacén.
– Se procederá a la descongelación y desglicerolización
en sistema cerrado en el equipo HAEMONETICS ACP 215®,
según el procedimiento del fabricante.
Del concentrado de hematíes descongelado y desglicerolizado,
se procederá a hacer su pesaje para determinar el volumen
neto de concentrado de hematíes a partir de la densidad; posteriormente
se elaboran 3 alícuotas, (D0, D7 y D14) mediante
uniones estériles realizadas con la conectora de tubos estéril
TSCD-II® (TERUMO) con bolsas de transferencia estériles y se
conservarán a 4+/- 2ºC. De esta forma se pueden hacer determinaciones
en distintos momentos sin exponer la misma unidad a
extracciones repetidas.
Sobre estas alícuotas se realizarán las siguientes determinaciones:
– Hemocultivo (aerobios y anaerobios).
– Hemograma (Hemoglobina, Hematocrito) (Sysmex XE
2100®).
– Hemoglobina libre en el sobrenadante, (Hemocue Ultra
Low®).
– Osmolaridad en el sobrenadante (Osmómetro Fiske 210®).
Sólo se realiza en alícuota D0 ya que es un parámetro que sirve para
asegurar un adecuado lavado del glicerol y sus cambios posteriores
no son achacables al proceso de lavado. Se calcula la diferencia
entre la osmolaridad de la solución conservante SAG-M (cloruro
sódico, adenosina, glucosa y manitol) y la del sobrenadante.
No se realiza determinación de leucocitos residuales, ya que
el producto inicial que se somete a glicerolización y posterior
congelación, son concentrados de hematíes del CTFAS, que son
sometidos a desleucotización universal mediante filtrado, que
asegura el contenido máximo de leucocitos (< 1 x 10 6/unidad)
por concentrado de hematíes y se comprueba a través de los controles
de calidad de producto que periódicamente son realizados
sobre los concentrados de hematíes líquidos.
Las determinaciones se realizarán en:
• Alícuota D0: inmediatamente tras el alicuotado (día 0).
• Alícuota D7: a los 7 días de la descongelación (día +7).
• Alícuota D14: a los 14 días de la descongelación (día +14).
De los datos obtenidos, se realizará una estadística descriptiva
(media, desviación estándar), se estudiará la correlación
entre el tiempo de almacenamiento y los distintos parámetros
(P de Pearson) y se aplicará el test de Student para establecer
si existen diferencias significativas en los parámetros estudiados
entre las muestras pareadas de las alícuotas. Se usan las fórmulas
estadísticas del programa EXELL (Microsoft Office®).